一、定义与化学本质

游离氨基酸总量（Free Amino Acids, FAAs）是指生物样本中未参与蛋白质合成的单体氨基酸的总和，包括α-氨基酸（如谷氨酸、赖氨酸）以及一些非蛋白氨基酸（如茶氨酸）。其突出特征在于分子同时存在游离氨基（-NH₂）和羧基（-COOH），且未通过肽键连接形成多肽或蛋白质。

二、检测原理

茚三酮显色法的反应机制为：在碱性条件（pH 8.0）下，游离氨基会与茚三酮反应，生成蓝紫色络合物（Ruhemann紫），其吸光度与氨基酸浓度呈正比。关键的检测方式包括：

• 柱前衍生化：氨基酸与邻苯二醛（OPA）或9-芴甲基氯甲酸酯（FMOC）反应，形成荧光衍生物，随后通过高效液相色谱（HPLC）进行分离和检测。
• 柱后衍生化：氨基酸经过离子交换色谱分离后，与茚三酮反应显色，适用于氨基酸分析仪。
• 超临界流体色谱法：在短短16分钟内便可分离出17种游离氨基酸，兼具高效与环保优势。

三、分类与检测指标

根据化学结构的不同，游离氨基酸的关键检测指标可分为：

• 总量指标：游离氨基酸总量（FAAs）与总氨基酸含量（TAA），包括游离态及水解态的氨基酸。
• 特定氨基酸：可根据实验需求选择性分析特定氨基酸。

四、样本类型与处理

检测所需的样本类型包括：

• 液体样本：例如血清或尿液。
• 固体样本：包括植物组织和动物组织等。

五、检测目的与应用

游离氨基酸分析在多个领域具有广泛的应用，包括：

• 食品质量评价
• 临床与营养研究
• 农业与生态监测

六、方法比较与选择

不同的检测方法各有优缺点，科学选择合适的方法对实验结果至关重要。

七、未来趋势

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